膜片鉗技術(patch clamp recording technique)。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜單一的或多個的離子通道分子活動的技術。它和基因克隆技術(gene cloning)并架齊驅,給生命科學研究帶來了巨大的前進動力。
1. 微電極的制備
2. 細胞標本的制備
3. 高阻封接的的形成
4. 離子單通道電流的記錄或全細胞記錄
1. 貼壁細胞:用胰酶將細胞消化下來,或用細胞刮將細胞刮下來,將培養(yǎng)液在室溫條件下1000轉/分,離心10分鐘,棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
2. 懸浮細胞:將培養(yǎng)液1000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
3. 細胞上清:3000轉/分,離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。