尼羅紅熒光染色溶液是一種旨在通過(guò)與脂類(lèi)物質(zhì)的結(jié)合并發(fā)出熒光檢測(cè)信號(hào),快速、敏感、可靠地活體定量測(cè)定細(xì)胞內(nèi)脂類(lèi)成分的常用熒光染料。適用于各種細(xì)胞包括細(xì)菌細(xì)胞,也用于蛋白質(zhì)電泳染色。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,性能穩(wěn)定,著色清晰靈敏。
尼羅紅染色劑(9-diethylamino-5H-benzo[alpha]-phenoxazine-5-one;Nile red)是一種親脂性的惡嗪類(lèi)熒光染料。與脂類(lèi)物質(zhì)包括臘酯(wax ester)和三酰甘油(triacylglycerol)以及各種脂肪酸結(jié)合后,在激發(fā)波長(zhǎng)543nm的激發(fā)下,顯示強(qiáng)烈桔紅色熒光(散發(fā)波長(zhǎng)598nm)。同時(shí)在紫外光的照射下顯示紅色。
1. 開(kāi)啟熒光顯微鏡
2. 小心抽掉25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)液
3. 加入3毫升用戶(hù)自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面
4. 小心抽掉清洗液,加入染色工作液
5. 在37℃培養(yǎng)箱孵育10分鐘,避免光照
6. 在熒光顯微鏡下觀(guān)察熒光細(xì)胞。
樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上,常溫運(yùn)輸送樣。
切勿固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng),切勿冷凍結(jié)冰。
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