免疫熒光是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光素制成熒光標記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。在細胞或組織中形成的抗原抗體復合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位,以及利用定量技術(shù)測定含量。
小鼠胰腺-免疫熒光(雙標)
石蠟切片脫蠟至水→抗原修復→5%羊血清封閉→加一抗→加二抗→DAPI封片→熒光顯微鏡下觀察,照片采集
1.樣本放置于25倍樣本體積的固定液中固定至少24 h(切勿固定時間過長,切勿冷凍結(jié)冰),常溫運輸送樣。
2.石蠟切片常溫運輸,冰凍切片-20℃運輸。
3、細胞爬片用固定液浸泡,4℃保存和運輸