腫瘤 細(xì)胞實(shí)質(zhì)就是腫瘤。腫瘤組織由實(shí)質(zhì)和間質(zhì)兩部分構(gòu)成,腫瘤實(shí)質(zhì)是腫瘤細(xì)胞,是腫瘤的主要成分,具有組織來(lái)源特異性。它決定腫瘤的生物學(xué)特點(diǎn)以及每種腫瘤的特殊性。通常根據(jù)腫瘤的實(shí)質(zhì)形態(tài)來(lái)識(shí)別各種腫瘤的組織來(lái)源,進(jìn)行腫瘤的分類(lèi)、命名和組織學(xué)診斷,并根據(jù)其分化成熟程度和異型性大小來(lái)確定腫瘤的良惡性和腫瘤的惡性程度。腫瘤細(xì)胞有三個(gè)顯著的基本特征即:不死性,遷移性和失去接觸抑制。除此之外,腫瘤細(xì)胞還有許多不同于正常細(xì)胞的生理、生化和形態(tài)特征。最為常見(jiàn)和危害性嚴(yán)重的腫瘤為肺癌、鼻咽癌、食管癌、胃癌、大腸癌、肝癌、乳腺癌、宮頸癌、白血病及淋巴瘤等。
一、取材:人腫瘤細(xì)胞來(lái)自外科手術(shù)或活檢瘤組織。取材部位非常重要,癌性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是好的培養(yǎng)材料。取材后宜盡快進(jìn)行培養(yǎng),如因故不能立即培養(yǎng),可貯存于4 ℃中,但不宜超過(guò)24 小時(shí)
二、培養(yǎng)基:一般常用的RPMI 1640、DMEM、Mc-Coy5A等培養(yǎng)基等皆可用于腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。
三、成纖維細(xì)胞的排除:成纖維細(xì)胞常與腫瘤細(xì)胞同時(shí)混雜生長(zhǎng),致難以純化腫瘤細(xì)胞。而且成纖維細(xì)胞常比腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)得快,最終能壓制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。因此排除成纖維細(xì)胞成為腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵。
排除成纖維細(xì)胞方法:(1)刮除法;(2)反復(fù)貼壁法;(3)酶消化法。