CCK-8是一種基于WST-8的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的檢測試劑。WST-8 [化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽]，是一種類似于MTT的化合物，它在電子載體1-Methoxy PMS存在的情況下，被線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細胞增殖成正比，與細胞毒性成反比。
EdU（5-Ethynyl-2'-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見，能夠在DNA復(fù)制時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在合成的DNA分子中，基于Apollo?熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可直接并準確地檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)、病毒繁殖等方面的研究，尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及各種藥物的細胞增殖及活力篩選實驗。
1. 接種細胞懸液100μl于96孔板，預(yù)先置于37℃，5% CO2飽和濕度培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)；
2. 每孔內(nèi)加入10μl的CCK-8試劑；
3. 培養(yǎng)板放培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時；
4. 酶標儀測定450nm波長度吸光值。
1. 細胞培養(yǎng)：接種細胞懸液于96孔板中，培養(yǎng)至正常生長階段
2. 藥物處理：根據(jù)實驗需要進行各種藥物處理
3. EdU標記：用細胞培養(yǎng)基按1000：1的比例稀釋EdU溶液 (試劑A)，制備適量50μM EdU培養(yǎng)基；
4. 細胞固定
5. Apollo染色
6. 圖像獲取及分析
