其他檢測:抗氧化酶系物質(zhì),廣泛分布在微生物、植物和動物體內(nèi)。在機體氧化與抗氧化平衡中起到至關(guān)重要的作用,與很多疾病的發(fā)生、發(fā)展密不可分。主要有:總超氧化物歧化酶 SOD、丙二醛MDA、谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX、過氧化氫酶CAT、一氧化氮NO、總一氧化氮合酶NOS、還原型谷胱甘肽GSH、總谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽T-GSH/GSSG、總抗氧化能力T-AOC、游離脂肪酸NEFA。
1、樣本接收:血清、血漿、培養(yǎng)上清液、組織細胞等。
2、實驗步驟:(具體項目依據(jù)相應(yīng)說明書操作)
1、血清樣本(干冰運輸)
將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存(-20℃或-80℃)。
2、血漿樣本(干冰運輸)
收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存(-20℃或-80℃)。
3、組織樣本
取組織塊(0.1g~0.2g)最少可到2~5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準確稱重,放入5ml的勻漿管中。按重量:體積=1:9的比例加入勻漿介質(zhì)或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊,進行勻漿。將制備好的勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定。制備好的勻漿液建議不要凍存,最好當天進行測定,如放置時間過長相關(guān)酶活會有所下降。
4、細胞樣本
貼壁細胞:用胰酶將細胞消化下來,或用細胞刮將細胞刮下來,將培養(yǎng)液在室溫條件下1000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
懸浮細胞:將培養(yǎng)液1000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
細胞上清:3000轉(zhuǎn)/分,離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。