血脂是血漿中的中性脂肪(甘油三酯和膽固醇)類脂(磷脂、糖脂、固醇、類固醇)的總稱,廣泛存在于人體中。它們是生命細胞的基礎(chǔ)代謝必需物質(zhì)。脂肪是人體內(nèi)含量最多的脂類,是體內(nèi)的一種主要能量來源;類脂是生物膜的基本成分。血脂檢查,主要是對血液中所含脂類進行的一種定量測定的方法。主要是測定血清中的總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇的水平等。通過檢查血漿中的血脂,可以預(yù)防或知曉是否患有肥胖癥、動脈硬化、高血脂、冠心病、糖尿病、腎病綜合征,以及其他一些心血管疾病。
1、樣本接收:血清、血漿、培養(yǎng)上清液、組織細胞等。
2、實驗步驟:(具體項目依據(jù)相應(yīng)說明書操作)
1、血清樣本(干冰運輸)
將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存(-20℃或-80℃)。
2、血漿樣本(干冰運輸)
收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存(-20℃或-80℃)。
3、組織樣本
取組織塊(0.1g~0.2g)最少可到2~5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準確稱重,放入5ml的勻漿管中。按重量:體積=1:9的比例加入勻漿介質(zhì)或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊,進行勻漿。將制備好的勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定。制備好的勻漿液建議不要凍存,最好當天進行測定,如放置時間過長相關(guān)酶活會有所下降。
4、細胞樣本
貼壁細胞:用胰酶將細胞消化下來,或用細胞刮將細胞刮下來,將培養(yǎng)液在室溫條件下1000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
懸浮細胞:將培養(yǎng)液1000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。
細胞上清:3000轉(zhuǎn)/分,離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。