microRNA(簡稱miRNA)的長度比較短,通常是20nt到24nt長度,因此用常規(guī)的qPCR法很難對其直接定量?,F(xiàn)在常用的對miRNA的定量方法主要有三種,分別為加尾法,莖環(huán)引物法,探針法。
QPCR驗(yàn)證miRNA在下咽癌腫瘤和粘膜組織中的表達(dá)
引物設(shè)計(jì)→取材→RNA提取逆轉(zhuǎn)錄成cDNA→實(shí)時(shí)熒光定量PCR-(QPCR產(chǎn)物電泳)→數(shù)據(jù)分析
1. 組織、細(xì)胞: -80℃保存、干冰運(yùn)輸;
2. 血液:EDTA抗凝管,4℃運(yùn)輸;
3. RNA樣本:體積≥10 μL,干冰運(yùn)輸。