甲基化特異性的PCR技術(shù)((methylation-specific PCR, MSP)是在亞硫酸鹽處理基因組DNA后,所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶(C)被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶(U)而甲基化的胞嘧啶則不變,設(shè)計(jì)兩對(duì)引物,即一對(duì)擴(kuò)增甲基化DNA鏈(引物對(duì)M),另一對(duì)擴(kuò)增非甲基化DNA鏈(引物對(duì)U),電泳檢測(cè)引物M和U是否擴(kuò)增成功,來(lái)判斷某個(gè)基因的甲基化情況。
DNA抽提→亞硫酸氫鹽處理→引物設(shè)計(jì)及擴(kuò)增→挑選克隆測(cè)序→數(shù)據(jù)分析
1. 組織、細(xì)胞:-80℃保存,干冰運(yùn)輸;
2. 血液:EDTA抗凝管,4℃運(yùn)輸;
3. DNA:體積≥50μl,濃度≥50 ng/μl,4℃運(yùn)輸。